Reis, R.1*; Costa, A.T.R. 1, 2; Ferreira, H.B.C.1; Fagundes, E.1,3
1 - IPEVE - Instituto de Pesquisas Veterinárias Especializadas
- Rua Esmeralda, 786, B.Prado, BH- MG, cep:30410.120
2-PUC Betim - Rua do Rosário, 1081, Betim, MG, cep:32.630.000
3- Escola de Veterinária da UFMG - Av. Antonio Carlos,6627
- Cx Postal 567 - BH, MG, cep:31.123.970
INTRODUÇÃO
O diagnóstico final da pleuropneumonia suína tem
sido feito pelo isolamento e identificação do Actinobacillus
pleuropneumoniae das lesões pulmonares. Doze sorotipos
de Actinobacillus pleuropneumoniae Biovar 1 e variantes de sorotipos
tem sido identificados (1 e 2). A sorologia por Elisa tem sido
desenvolvida para alguns sorotipos, visando identificar rebanhos
infectados reagentes, porem sem sintomas. É muito importante
diferenciar infecção de doença. De fato,
muitos rebanhos são infectados com App sem apresentar qualquer
evidência clinica. Devido as reações cruzadas
entre alguns sorotipos, eles tem sido agrupados na forma de kits
para diagnostico, segundo esta característica a saber:
APP 1, 9, 11; APP 4 e 7; APP 5 a e 5 b; APP 2; APP 3, 6, 8. (3
e 4). Os sorotipos 10 e 12 não são comumente contemplados
nos kits de Elisa comerciais, sendo portanto, subestimada suas
importâncias clinicas e epidemiológicas. (4) O presente
trabalho teve por objetivo fazer um estudo sorológico nos
sítios 1, 2, 3 de um rebanho, onde se diagnosticou pleuropneumonia
aguda e letal pelo APP 10 no sitio 3 por isolamento e comparar
os resultados de dois kits de Elisa para o sorotipo 10 nas mesmas
amostras de soros testados em 6 granjas distintas.
MATERIAL E MÉTODOS
Foram realizadas sorologias por Elisa indireto em 7 diferentes
granjas sendo uma de três sítios. Foram testadas
65 porcas do sitio 1, 15 leitões de 17 a 49 dias de idade
do sítio 2 e 30 suínos do sitio 3 com idade entre
126 a 188 dias , utilizando kits de Elisa grupo - específicos
para App 2, App 3, 6, 8; App 1, 9, 11; App 4 e 7; App 5a e 5b,
produzidos pelo laboratório Biovet, Canadá.Sessenta
e seis porcas do sitio 1, 15 leitões do sitio 2 e 29 suinos
do sitio 3 foram testados para o App 10 com kit desenvolvido pela
Dra Jaluza Deon Kich e ainda em fase experimental, CNPSA/ Embrapa,
Concórdia. Noventa outras amostras de soros destes 3 sítios
da mesma granja também foram testadas pelo kit de Elisa
desenvolvido pelo laboratório Biovet , Canadá, em
cooperação com a Universidade de Montreal. Além
destes soros, 90 amostras de porcas de seis outras granjas foram
simultaneamente testadas por ambos kits / Elisa para detecção
de anticorpos contra o sorotipo 10.
RESULTADOS E DISCUSSÃO
Os resultados do presente trabalho são apresentados nas
Tabelas seguintes.
Tab.1 - Resultados da sorologia por Elisa com Kit Grupo - Especifico
(Biovet) no Sitio 1, em 65 soros testados:
| Resultados |
APP 2 |
APP 3,
6, 8 |
APP 1, 9, 11 |
APP 4 E 7 |
APP 5a e 5b |
| Positivo |
1 (1,5%) |
61 (93,8%) |
0 (0,0%) |
0 (0,0%) |
0 (0,0%) |
| Suspeito |
17 ( 26,2%) |
1 (1,5%) |
5 (7,7%) |
0 (0,0%) |
20 (30,8%) |
| Negativo |
47 ( 72,3%) |
3 (4,6%) |
60 (92,3%) |
65 (100%) |
45 (69,2%) |
Tab. 2- Resultados da sorologia por Elisa com KIT Grupo - Especifico
(Biovet) no Sitio 2, em 15 soros testados:
| Resultados |
APP 2 |
APP 3, 6, 8 |
App 4 e 7 |
App 5a e 5b |
App 1,9,11 |
| Positivo |
0 (0,0%) |
2 (13,3%) |
0 (0,0%) |
0 (0,0%) |
0 (0,0%) |
| Suspeito |
0 (0,0%) |
2 (13,3%) |
0 (0,0%) |
0 (0,0%) |
0 (0,0%) |
| Negativo |
15 (100%) |
11 (73,4%) |
15 (100%) |
15 (100%) |
15 (100%) |
Tab. 3- Resultados da sorologia por Elisa para APP 10 (Biovet)
nos sítios 1, 2, 3 em 90 amostras testadas:
| Sítios |
Positivos |
Negativos |
| Sitio
1 |
7/30(23,3%) |
23/30(76,7%) |
| Sitio
2 |
0/30(0,0%) |
30/30(100%) |
| Sitio
3 |
21/30(70,0%) |
9/30(30,0%) |
Tab. 4- Resultados de Elisa Experimental para App 10 ( CNPSA
/ Embrapa ) nos sítios 1, 2 e 3:
| Sítios |
Positivos |
Negativos |
| Sitio
1 |
46/66(69,7%) |
20/66(30,3%) |
| Sitio
2 |
0/15(0,0%) |
15/15(100%) |
| Sitio
3 |
21/29(72,4%) |
8/29(27,6%) |
Tab. 5- Resultados da sorologia por Elisa Grupo Especifico no
Sitio 3 ( Biovet), em 30 soros testados:
| Resultados |
APP 2 |
APP 3, 6, 8 |
App 1,9,11 |
App
4 e 7 |
App 5a e 5b |
| Positivo |
0 (0,0%) |
20 (66,6%) |
0 (0,0%) |
0 (0,0%) |
0 (0,0%) |
| Suspeito |
8 (26,6%) |
2 (6,6%) |
0 (0,0%) |
0 (0,0%) |
0 (0,0%) |
| Negativo |
22 (73,3%) |
8 (26,6%) |
30 (100%) |
30 (100%) |
27 (90,0%) |
CONCLUSÕES
Os testes de Elisas para detecção de Anticorpos
contra Actinobacillus pleuropneumoniae constituiem-se em importante
ferramenta na conclusão do diagnostico. Alem disso, servem
como base para estudos epidemiológicos e avaliação
da eficiência dos programas preventivos utilizados. Mais
estudos são necessários para comparação
entre os kits de Elisa utilizados na detecção de
anticorpos contra o sorotipo 10. A sorologia contra Actinobacillus
pleuropneumoniae sorotipo 10 também deveria ser incluída
nos testes sorológicos de rotina, já que este sorotipo
é patogênico e tem sido isolado de animais clinicamente
doentes.
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1-BURK HARDT, D.; MOREAU, I.A.; CORNAGLIA, E. Sero - Diagnostic
and PCR assays for the detection of A. pleuropneumoniae and toxin
production. Am. Ass. Swine Vet. 81- 82,2002.
2-GOTTSCHALK, M.; BROES, A.; FITTIPALDI, N. Recent Development
on Actinobacillus pleuropneumoniae. Am. Assoc. Swine Veterinarian,
387- 391, 2003.
3 - MARSTELLER, T. A.; FENWICK, B. Actinobacillus pleuropneumoinae.
Disease and serology. Swine Health and Production v.7(4):161 -
165, 2002.
4-MORENO, A.M. BARBARINI, JR.O. e BACCARO MR. Levantamento sorológico
para Actinobacillus Pleuropneumoniae em criações
de suínos no período de Dezembro de 96 a Julho de
99. IX Conj. Abraves, 1999 - Disease and serology.
AGRADECIMENTOS
Nossos agradecimentos à Dra.Jaluza Deon Kich, do CNPSA-Embrapa,
à Dra.Estella Cornaglia do Biovet (Canadá) e ao
Dr.Marcelo Gottschalk da Universidade de Montreal (Canadá),
pelos decisivos apoios na realização deste trabalho.
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